Når cellene vi dyrker i

cellefabrikker forurenset, er de fleste vanskelige å håndtere.Hvis de forurensede cellene er verdifulle og vanskelige å få tak i igjen, kan følgende metoder brukes for å fjerne dem.

1. Bruk antibiotika

Antibiotika er mer effektive til å drepe bakteriercellefabrikker.Kombinasjonsmedisin er mer effektivt enn medisin alene.Forebyggende medisiner er mer effektive enn medisiner etter kontaminering.Forebyggende medisinering bruker vanligvis et dobbelt antibiotikum (penicillin 100u/mL pluss streptomycin 100μg/mL).Etter forurensning må rengjøringsmetoden være 5 til 10 ganger større enn den vanlige mengden.Legemidlet skal brukes i 24 til 48 timer etter tilsetningen, og deretter erstattes med vanlig rutine.Kulturvæske.Denne metoden kan være effektiv i de tidlige stadiene av forurensning.I tillegg til penicillin og streptomycin, kan antibiotika som brukes også inkludere gentamicin, kanamycin, polymyxin, tetracyklin, nystatin osv. Vanligvis brukt er 400 til 800 μg/mL kanamycin eller 200 μg/mL tetracyklin.Mediet skiftes hver 2. til 3. dag og gis videre i 1 til 2 generasjoner for behandling.I de senere år har det blitt rapportert at 4-fluor, 2-hydroksykinolin (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutilin-derivat (Pleu-romutilin-derivat, BM-Cyclin2: BM-1 og tetracyklin-derivat (BM-2)) Antibiotika er effektivt til å drepe mykoplasma når det brukes alene eller i kombinasjon.Disse tre antibiotika er alle tilberedt i 250X konsentrerte løsninger i PBS og lagret ved -20 °C for senere bruk.Brukskonsentrasjonen Cip er 10 μg/mL, BM-1 er 10 μg/mL, og BM-2 er 5μg/mL.Ved bruk, aspirer først det forurensede kulturmediet, tilsett RPMI1640 kulturmedium som inneholder BM-1, aspirér deretter kulturmediet etter 3 dager, tilsett RPMI1640 kulturmedium som inneholder BM-2, og dyrking i 4 dager, og så videre i 3 påfølgende dager .runder, inntil det er bevist ved 33258 fluorescerende fargemikroskopi at mycoplasma er eliminert, deretter tilsettes normalt dyrkingsmedium for dyrking og passasje 3-4 ganger.

2. Varmebehandling

Inkubering av kontaminert vevskultur ved 41°C i 18 timer kan drepe mykoplasma, men har negative effekter på cellene.Derfor bør en foreløpig test utføres før behandling for å utforske oppvarmingstiden som kan drepe mykoplasma i størst grad og ha minst mulig innvirkning på cellene.Denne metoden er noen ganger upålitelig.Hvis den behandles med legemidler først og deretter varmes opp til 41°C, vil effekten bli bedre.

3. Bruk mykoplasmaspesifikt serum

Mykoplasma-kontaminering kan fjernes med 5 % kaninmykoplasma-immunserum (hemagglutinasjonstiter 1:320 eller høyere).Fordi det spesifikke antistoffet kan hemme veksten av mykoplasma, blir det negativt 11 dager etter antiserumbehandling og forblir negativt 5 måneder senere.er negativ.Imidlertid er denne metoden mer plagsom og ikke så praktisk og økonomisk som å bruke antibiotika.

4. Andre metoder

I tillegg til de ovennevnte metodene for å fjerne kontaminering, finnes det også inokulering og steriliseringsmetoder hos dyr, makrofagfagocytosemetoder, metoder for å tilsette bromoracil til kontaminertkulturflaskerog deretter bestråle dem med lys, og filtreringsmetoder, etc., men de er alle mer plagsomme og ineffektive.Derfor, så snart mykoplasma-forurensning oppstår, med mindre den er av spesielt viktig verdi, blir den vanligvis kastet og dyrket på nytt.

vennligst kontakt Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709